如何使用显微镜浸渍油获得高分辨率图像- Rs' Science开云体育全站app下载安装

(更新5/19/2020)

本文将介绍

什么是显微镜浸油

显微镜浸泡油是一种透明的油，具有独特的光学特性和粘度，用于显微镜，特别是在更高的放大倍率。

图像的质量不仅取决于放大但同时决议你的显微镜镜头。分辨率(R)是你分辨样本中细节的能力。高放大但低分辨率只能给你一个模糊的图像。

下面是分辨率的方程:

R = λ/ (2xNA)， R:分辨率;λ:光的波长;拿拿淋:数值孔径

数值孔径(NA)决定了你的显微镜所能达到的分辨率的极限。简单地说，NA与你的镜头收集光线的能力有关。NA的值范围从0.025非常低的放大率物镜(1倍到4倍)到高达1.6高性能物镜使用专门的浸泡油。NA越高，分辨率越好。

使用浸入式镜头和油可以提高你的分辨率，但为什么呢?

当光从一种材料到另一种材料(例如:从玻璃到空气)时，由于两种材料的折射率不同，光线会弯曲。光可能会被折射或散射而消失。一般来说，当使用倍率较低的物镜(4倍或10倍)时，光的折射通常是不明显的。然而，一旦你使用了63x或更高的物镜，当使用干镜头(即没有浸油)时，光线的折射是显著的。

如果你能减少光的折射量，更多的光通过显微镜载片将被定向通过非常狭窄的直径的高倍物镜。在显微镜下，更多的光线等于更清晰、更清晰的图像。通过在充满空气的空间中放置折射率等于玻片折射率的浸渍油等介质，可以使更多的光通过物镜，观察到更清晰的图像。

[在此图中]轻质耐火材料在空气中的对比在浸渍油中的说明。
空气的折射率是1，而浸油的折射率是1.51，非常接近盖玻璃。因此，允许所有的光通过镜头。

下面是一个例子。这些图像是用一个带有63倍物镜的显微镜拍摄的。左图为干燥(无油)，右图为显微镜浸油。注意图像质量和决议在干燥捕获的图像和浸泡油捕获的图像之间。

不是每一个镜头都适合浸油使用。通常情况下，放大率较低的镜头不需要浸泡油。当使用放大率更高的镜头时，你将需要浸泡油，但要确保镜头是一个油镜．如果不确定，请查阅手册或供应商。

重要的:在使用浸入式油之前，确保你的物镜是用浸入式油制作的。在无油物镜上使用浸油会损坏物镜。一定要先阅读显微镜的使用说明书。

使用低倍率物镜找到感兴趣的区域。把镜头从低倍移到40倍的物镜上，在每一个物镜上停下来对焦，确保感兴趣的区域仍然在视图的中心。
在40倍(干)和100倍(油)镜头之间旋转物镜，但不要完全接触油物镜。
注意:年代渗出性中耳炎63x甚至40x也可能是油镜头年代．使用前一定要检查你的物镜。
将“一滴”浸泡油直接滴在封面上。
慢慢转动你的物镜，使物镜的鼻部与油滴接触。
只使用精细焦点控制，非常缓慢地使你的标本回到焦点。记住，现在物镜非常接近封面。
当你用完你的油浸镜头，小心地擦拭所有玻璃表面(镜头和载玻片)用一张镜头清洁纸。
然后，用第二张有少量酒精(乙基或异丙基)或镜头清洗液(推荐)的镜头纸再次擦拭所有玻璃表面，以去除任何残留的油。未能从镜片上清除浸没油将导致镜片上的油变硬，这将影响未来的清晰度。
注意:在清洗载玻片之前，不要将物镜从100倍(油)转回40倍(干)。否则，你将把浸没油物镜。

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