这篇文章将回顾复合显微镜的结构,并向你解释每个部分是如何工作的,以给我们放大的图像。
本文将介绍
显微镜概述
显微镜是什么?显微镜是一种用来观察肉眼看不见的小物体的仪器。
我们有一篇关于各种显微镜的历史、类型和演变。如果你对此感兴趣,请点击上面的链接。
“显微镜”这个名字来自两个词——“micro”和“scope”。
“Micro”的意思是小的或微小的。“范围”的意思是查看或观察。因此,显微镜可以理解为一种观察微小事物的仪器。
什么是“复合显微镜”?
复合显微镜是光学显微镜中最常见的一种。术语“复合”指的是有多个透镜的显微镜。基本上,复合显微镜通过一对对准的物镜和眼晶状体产生放大的图像。相比之下,“简单显微镜”只有一个凸透镜,功能更像玻璃放大镜。
(在这张图中)两台“古董”显微镜在生物学历史上扮演了重要的角色。
左图:安东·冯·列文虎克的显微镜是一个只有一个凸透镜的简单玻璃放大镜。他发现了许多微生物,比如草履虫,使用这种简单的显微镜。右图:罗伯特·胡克观察到细胞用他改良的复合显微镜。他创立了细胞理论,该理论认为,所有的生物都是由细胞构成的,所有的生命功能都发生在细胞中,所有的细胞都来自其他细胞。
图片来源:奥林匹斯山。
复合显微镜的标记图
复合显微镜的主要结构部件
复合显微镜有三个主要结构部分。
- 的头包括显微镜的上部,其中包含最关键的光学元件,以及显微镜的目镜管。
- 的基地作为显微镜的基础和照明装置。
- 的手臂连接底座和头部部件。
注意:携带复合显微镜时,请同时握住显微镜臂和底座,如下图所示。
复合显微镜的光学元件
显微镜的许多光学部件一起工作,放大并产生置于载玻片上的标本的图像。这些部件包括:
目镜
目镜(或眼晶状体)是显微镜顶部的透镜部分,观众可以透过它来观察。标准目镜的放大率是10倍。您可以更换5 - 30倍的目镜。
(图中)目镜内部结构。
目前的目镜设计不再是一个单一的凸透镜。相反,目镜由几个光学透镜共同工作,为我们提供最好的成像。
图片来源:分子的表达。
目镜管
目镜管装有目镜镜头。它将目镜固定在正确的位置,与物镜完美对齐。它还将目镜和物镜置于一定的距离范围内,生成对焦图像。
对于单眼显微镜,只有一个目镜管。双目显微镜有两个目镜,可以让你用两只眼睛看东西。目镜管是灵活的,可以旋转/调整,以适应用户两眼之间的距离(瞳孔间调节)。三目镜显微镜有一个额外的第三目镜管,用于连接显微镜照相机。
单目、双目和三目复合显微镜的例子。
[图中]屈光度调整。
双目显微镜的目镜通常有一个屈光度调节环,可以校正你两只眼睛的视力差异。通过调整它,两只眼睛都能看到清晰的图像。
图片来源:点成像。
客观的镜头
物镜是显微镜上观察标本的主要光学透镜。物镜收集穿过标本的光,并将光束聚焦形成放大图像。物镜是显微镜最重要的部件。
[在此图中]物镜的结构。
光学显微镜中最重要的成像部件是物镜。目前的目标是一个复杂的多透镜组合,有很大的功率聚焦光波。
图片来源:蔡司。
[图中]一组物镜。
每个物镜都有它的信息(即放大率)和颜色代码标签在侧面。
图片来源:Accu-scope。
通常,一架复合显微镜配有3或4个物镜。最常见的设置是:
扫描物镜(4倍)
扫描物镜在所有物镜中放大率最低。“扫描”物镜的名称来源于这样一个事实:它为观察者提供了足够的放大率,可以对幻灯片进行广泛的概述,本质上是对幻灯片的“扫描”。
低功率物镜(10倍)
低倍率物镜比扫描物镜具有更高的放大倍率,是一般观看目的中最有帮助的镜头之一。
高倍物镜(40倍)
高倍物镜(也称为“高干”镜头)是理想的观察样品内的精细细节。
油浸物镜(100x)
油浸物镜提供最强大的放大。但是,空气的折射率和你的玻片略有不同,所以必须添加一种特殊的浸泡油来弥合差距。没有浸泡油,100x镜头将无法正常工作。标本看起来很模糊,你不能达到理想的放大倍数或分辨率。
查看我们的帖子了解更多浸油。
[在此图中]“前”和“后”使用浸油。
左图为干燥(无油),右图为显微镜浸油。注意图像质量和分辨率之间的差异捕获的干燥和浸渍油。
放大率高的物镜通常更长。因此,高倍率物镜(100倍)的尖端非常接近标本。在观看和操作高倍物镜时,请非常小心。请查看我们的邮件更多保养显微镜的技巧。
一些高质量,更高功率的目标(从40x开始)是弹簧负载的。装有弹簧的物镜会在物镜碰到载玻片时缩回,防止物镜和载玻片同时受损。
如何计算放大功率?
用目镜和物镜的倍率乘以可得总倍率:
例如:
[10倍目镜]x[40倍物镜]= 400倍总放大倍数
[在此图中]从低到高倍率相同的标本视野。
在低倍率(5倍和10倍)下,你可以看到整个标本的整体视图-豇豆家族的根尖。通过走近(用更高的放大率),你会开始注意到细胞和它们的细胞核(蓝点)。在高倍放大(63倍和100倍的镜头浸油),你可以看到一些核看起来不同于其他的。这些纺锤形的细胞核正在分裂(或在有丝分裂中),它们的染色体(DNA束)正在分离。开云体育电脑官网
物镜上的数字是什么意思?
关于物镜的信息标注在它的侧面。你应该注意的关键信息是放大率(即100倍),NA(即1.25)和所需的介质(即油;没有标签意味着空气)。高端显微镜也有消色差、偏中心或偏焦距镜头。镜头有颜色编码,如果符合DIN标准,可以在显微镜之间互换。
数值孔径(NA)决定了你的显微镜所能达到的分辨率的极限。NA的值范围从0.025非常低的放大率物镜(1倍到4倍)到高达1.6高性能物镜使用专门的浸泡油。NA越高,分辨率越好。
鼻甲
鼻翼也被称为旋转炮塔。鼻片是一个圆形结构,容纳物镜。不同的物镜都有固定的孔。
(此图)要安装物镜,将物镜向左拧找到穿线,然后开始拧物镜,就像拧螺丝一样。
要改变放大功率,只需旋转炮塔选择不同的目标。当每个镜头摆动到位时,一声可听到的咔哒声确定了它的正确位置。当转动鼻塞时,抓住它边缘的环,而不是瞄准镜。使用目标作为手柄可能会偏离中心,并可能损坏它们。当你从低倍镜头切换到高倍镜头时,要特别注意目标和幻灯片之间的距离。
(此图)总是抓住鼻环,而不是瞄准镜,以切换物镜镜头。
样品阶段
舞台是一个支撑滑梯的平平台。这个舞台有一个开口(叫做孔径)以便照亮的光束通过。的期剪辑固定好幻灯片。
如果你的显微镜有一个机械台,将滑梯固定在滑座可以通过转动两个旋钮在两个垂直(X - Y)方向上移动。一个旋钮可以左右移动滑梯;另一种是前后移动。机械台提供了更稳定的运动,以取代需要手动移动的标本滑块。
(此图)机械级的近景。
(此图)使用舞台控制定位您的幻灯片在两个垂直方向(X - Y)。
粗焦和精焦旋钮
两个调节旋钮用于聚焦显微镜:细聚焦旋钮和粗聚焦旋钮。两个旋钮都可以上下移动舞台。你应该使用粗焦距旋钮使标本接近或接近焦距。然后你使用精细焦点旋钮来锐化图像的焦点质量。用高倍物镜观看时,只需用细旋钮仔细对焦。
(此图)一对粗焦和精焦旋钮。
这两个焦点旋钮是同轴的,意味着他们是建立在同一轴与精细的焦点旋钮在外面。同轴对焦旋钮更方便,因为观众不需要摸索不同的旋钮。
架停止
机架止动装置是一种安全装置,防止滑块太高而撞到物镜。
照明器
光源是显微镜的光源,通常位于显微镜的底部。卤素灯泡通常用来提供稳定的光源。目前,LED灯越来越受欢迎。
有时用镜子代替内置灯。镜子是用来反射来自外部光源的光通过舞台的底部。
冷凝器
聚光器是用来收集和聚焦从光源到标本的光的透镜。冷凝器通常与虹膜隔膜一起安装在舞台下方。
(此图)聚光镜收集来自光源的光,并将其集中成一个锥状光,以均匀的强度照亮整个视场的标本。
对于获得400倍及以上的清晰图像,冷凝器是至关重要的。冷凝器的放大倍率越高,图像清晰度越高。对于40倍物镜,安装0.65 N.A或更大的聚光镜是理想的。如果你的显微镜是1000倍或以上,一个聚光镜与1.25或更高的聚光镜需要更大的清晰度。
阿贝聚光镜
大多数高达1000倍的精密显微镜都配有阿贝冷凝器,可以通过上下移动来聚焦。阿贝冷凝器应该设置在离幻灯片最近的1000倍,并随着放大倍率的降低而移远。
(此图)左图:阿贝冷凝器和虹膜通常集成在一起,放置在舞台下面。右:通过转动冷凝器聚焦旋钮到工作位置,将冷凝器/膜片部分向上移动。
可变光圈
虹膜位于聚光镜下方,光源上方。这个装置可以调节通过幻灯片投射的光锥的强度和大小。
(此图]虹膜的结构。
阿贝电容器和虹膜是高质量显微镜必不可少的。结合起来,它们分别控制了应用到标本上的光的焦点和数量。虹膜和阿贝冷凝器的设置取决于标本的透明度和您希望在图像中的对比程度。
这些部分是建立一个科勒照明,这提供了样品的均匀照明。
冷凝器聚焦旋钮
这个旋钮移动冷凝器向上或向下,以控制照明聚焦在样品上。
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总结
本文综述了复合显微镜的组成部分及其功能。以下是一些要点:
- 复合显微镜有多个透镜,可以生成平坦、薄的标本的高倍倍率图像。
- 显微镜有三个主要的结构部分:头,底座和臂。
- 用两只手握住显微镜的手臂和底座来举起显微镜。
- 显微镜的光学透镜主要有两部分:目镜(10倍)和物镜(4倍、10倍、40倍、100倍)。
- 总放大倍率是目镜和物镜倍率的乘积。
- 照明器提供光源。光被聚光镜聚焦并通过放置在台上的样品。然后光被物镜收集并形成图像。我们通过目镜看到放大的图像。
- 清晰的图像需要通过调节粗焦和精焦旋钮来实现完美聚焦。
- 虹膜和阿贝聚光镜对于高倍率的清晰图像是必不可少的。